技術(shù)文章
使用BTX電融合緩沖液應(yīng)注意:
1、保持無菌環(huán)境。建議使用標(biāo)準(zhǔn)的無菌技術(shù),以避免在使用過程中受到污染。
2、反復(fù)洗滌。BTXpress Cytofusion Medium C是一種低電導(dǎo)率培養(yǎng)基,專為電融合而設(shè)計。痕量的高電導(dǎo)率溶液如PBS或組織培養(yǎng)生長培養(yǎng)基可破壞融合過程。因此,在融合過程之前用BTXpress Cytofusion Medium C*清洗細(xì)胞是很重要的。
3、清潔電融合室。為避免其他離子污染源,每次使用后清潔電熔室,并用無菌去離子水*沖洗。
4、室溫電融合。為了大限度地提高細(xì)胞融合效率,請在室溫下使用BTXpress Cytofusion Medium C. 終洗滌之前的細(xì)胞洗滌可以在4℃下進(jìn)行。
5、較大限度地減少緩沖區(qū)的時間。雖然Cytofusion Medium C無毒,但它不含有*支持細(xì)胞活力的營養(yǎng)素。為了獲得宜結(jié)果,大限度地減少細(xì)胞懸浮在BTXpress Cytofusion培養(yǎng)基C中的時間。不建議細(xì)胞在終清洗后超過1小時保留在BTXpress Cytofusion Medium C中。
6、5:1直接稀釋。電融合后,BTXpress Cytofusion培養(yǎng)基C中的細(xì)胞可以在細(xì)胞培養(yǎng)基中稀釋而不洗滌細(xì)胞。將五份*培養(yǎng)基稀釋至一份BTXpress Cytofusion Medium C的小稀釋度。或者,可以在生長培養(yǎng)基中洗滌細(xì)胞以在培養(yǎng)之前*除去BTXpress Cytofusion培養(yǎng)基C。